Science Focus ( Issue 21)
25 光子能不受阻礙地穿過細胞周圍的液體,但當遇到細胞時, 光子會被迫偏離其原來的軌道,這種光的轉向稱為散射。 前向散射(forward scatter)量度與細胞膜接觸後輕微繞 射的光量,用於量度細胞的相對大小;細胞越大,前向散射 越多 [2, 3]。另一方面,側向散射(side scatter)量度與細 胞內部細胞器或顆粒接觸後以更大角度反射的光量,用 作量度細胞相對的內部複雜性;細胞內的物體越多, 側向散射就會越多 [2, 3]。此外,激光還可以激發與 抗體結合的任何熒光團,讓我們能檢測到已標記 的細胞。這樣,細胞就能被有效地識別了。 除了識別,流式細胞技術的一個擴展功能 是細胞分類。這是通過振動細胞儀中的液體 流,使液體分成大多只含有單個細胞的液滴 而達成的。然後,我們根據之前測試過的 細胞特性(例如熒光強度)賦予每個含有細 胞的液滴不同的電荷。帶有不同電荷的液滴 會在熒光流式細胞分選儀(fluorescence- activated cell sorting (FACS) machine) 中轉向並進入機器內的不同容器,令目標細胞 群可以被保留作分析或進一步實驗,這些細胞 可以是成功轉化並表達熒光標記的細胞,或是表 達某種蛋白標記的腫瘤細胞或白血細胞(包括 B 細 胞和 T 細胞)[4]。 在流式細胞技術被發明之前,從含有各種各樣細胞的 細胞群中準確識別特定細胞幾乎是不可能的事,更不用說 把它們從中分離。現在,流式細胞技術已成為一般和臨床 實驗室常見而不可或缺的技術。 1 HIV 病毒攻擊 CD4+ T 細胞。 References 參考資料: [1] Herzenberg, L. A., Parks, D., Sahaf, B., Perez, O., Roederer, M., & Herzenberg, L. A. (2002). The History and Future of the Fluorescence Activated Cell Sorter and Flow Cytometry: A View from Stanford. Clinical Chemistry, 48 (10), 1819–1827. [2] Adams, D. (n.d.). LESSON 1: FLOW CYTOMETRY SIGNALS (SCATTER AND FLUORESCENT). Retrieved from https:// brcf.medicine.umich.edu/cores/flow-cytometry/ training-education/lessons/lesson-one-flow-cytometry- signals-scatter-and-fluorescent/ [3] Bakke, A. C. (2001). The Principles of Flow Cytometry. Laboratory Medicine, 32 (4), 207–211. [4] McKinnon K. M. (2018). Flow Cytometry: An Overview. Current protocols in immunology, 120 , 5.1.1–5.1.11. doi:10.1002/cpim.40
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