176 摘要 双萜类化合物是人类已知的重要药物家族，但其有限 及不可持续的供应以及充满挑战性的有机合成方法阻 碍了基于双萜类化合物的新药开发。该研究项目旨 在发展和实施利用微生物发酵生产双萜类化合物的新 型平台，最终目标是开发新的活性天然产物。该新平 台的主要功能是为海洋微生物提供感兴趣的双萜类支 架，并筛选可以有效地将前体转化为最终产品的微生 物。通过改造生物合成方法来同位素标记感兴趣的双 萜支架，继而利用质谱分析进行分子跟踪以及鉴定微 生物培养基中经修饰的代谢物。另外，可以选择不同 支架优化生产具有生物活性的化合物，还可以根据含 有该支架天然化合物的已知活性来设计相关的生物测 定方法。 研究活動和進展 • 通过基于质谱的高效液相色谱纯化同位素标记的双 萜类(骨架)； • 为了给高通量平台设计提供参数，对7种海洋菌株 和对照进行了初步验证试验。 • 对40种海洋菌株进行初步筛选试验。 主要發現 • 使用XAD4树脂，LH20尺寸排阻色谱和反相高效 液相色谱从～10L细胞培养液中纯化出～1mg双萜化 合物； • 验证实验确定了诸如微生物生长时间、化合物补剂 浓度、有机提取方法和LC-MS分析所需的培养规模 等关键参数； • 初步筛选试验揭示了双萜类骨架化合物的分解消耗 及衍生化，但大多数衍生物的质量小于双萜骨架； • 提取效率差可能是没有检测到大于双萜骨架分子量 的衍生物的原因。 研究成果 发表文章 1 培养人才 2 利用海洋微生物工廠生產新型活性雙萜類化合物 张文君教授 加州大学伯克利分校 图1. 在海洋菌株库中筛选同位素标记的双萜类骨架
RkJQdWJsaXNoZXIy NDk5Njg=