188 摘要 海洋微生物是药用天然产物的丰富来源，其中套索肽 是一类未经开发的天然肽，具有独特的结构拓扑和有 趣的生物学活性。郭教授团队将开发体内和体外系 统来重组合成新的套索肽天然产物。此外，他们将进 行生物化学和结构方面的研究，通过结合蛋白质X射 线晶体学与生物化学来全面阐明套索结形成的分子机 制。他们将利用在机理研究中获得的启发，通过体外 重建系统来设计合成具有生物学活性的新型套索肽， 旨在开发基于海洋套索肽的新型药物。 研究活動和進展 • 过表达Microcin J25生物合成前体McjA； • 过表达Microcin J25生物合成酶McjB和McjC； • 在pET-Duet载体中同时表达McjB和McjC酶，以 及McjA和McjB酶； • 开发纯化可溶性McjB和McjC酶的方法； • 构建能成功表达Microcin J25生物合成簇的质粒； • 开发分离套索肽Microcin J25的方法。 主要發現 • 氮和碳末端六组氨酸标记的McjB和McjC蛋白都不 与Ni2 + -NTA色谱柱结合，这表明氮和碳末端的 六组氨酸标记可能隐藏在蛋白质内部，无法通过 亲和力结合到色谱柱上； • McjB和McjC蛋白不能在Nij + -NTA柱色谱上进行 共纯化； • 无论六组氨酸标记是在蛋白的氮端或碳端，纯化 后的蛋白都没有活性； • 在McjC的碳末端添加标记会妨碍套索肽的合成， 而其他修饰却没有这方面的影响。在缓冲液中加 入二硫苏糖醇可以保留蛋白质的活性。 研究成果 发表文章 1 培养人才 6 海洋套索肽：其生物合成重組和機理研究 郭志宏教授 香港科技大学 图2. Microcin J25 生物合成活性的体外重建
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